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法國科瑪嘉VRE顯色培養(yǎng)基
更新時間:2024-05-15
法國科瑪嘉VRE顯色培養(yǎng)基
用于耐萬古霉素糞腸球菌(E.faecalis)和尿腸球菌(E.faecium)的鑒定和計數(shù)。
【組分】
瓊脂 15.0g/L
蛋白胨和酵母浸出物 20.0 g/L
色素 27.3 g/L

抗萬古霉素腸球菌(VRE)顯色培養(yǎng)基使用說明書

法國科瑪嘉VRE顯色培養(yǎng)基

用于耐萬古霉素糞腸球菌(E.faecalis)和尿腸球菌(E.faecium)的鑒定和計數(shù)。

組分

瓊脂                               15.0g/L

蛋白胨和酵母浸出物                 20.0 g/L

色素                               27.3 g/L

鹽類                               5.0 g/L

PH                                6.8±0.2

根據(jù)需要,可以進行經(jīng)典配方的調(diào)整或補充。

操作

  1. 稱取瓶內(nèi)干粉67.3g,用1000ml蒸餾水或純水溶解,可以按照67.3 g/L的比例擴大或 縮小。
  2. 將上述干粉緩慢倒入蒸餾水中,充分攪拌直至瓊脂*溶解。
  3. 加熱至100℃,并且不斷攪拌。如果使用高壓鍋,請不要加壓,加熱不能超過100℃。使用微波爐加熱時,在煮沸后立即移出微波爐并不斷攪拌,而后移入微波爐再加熱,直至*溶解(大氣泡代替泡沫產(chǎn)生,大約需要2分鐘)。
  4. 把VRE基礎(chǔ)培養(yǎng)基冷卻至45-50℃?zhèn)溆?,此基礎(chǔ)培養(yǎng)基為乳白色。
  5. 取增補劑一瓶,加入1ml 54%酒精溶解,以無菌操作把增補劑加入到備用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,輕輕混合均勻(使其終濃度為60mg/L),避免氣泡,也可按照60mg/L的比例擴大或縮小 。
  6. 使用傾注程序:準備直徑為90mm的已滅菌的帶蓋培養(yǎng)皿,每個培養(yǎng)基接種1ml樣品,然后傾注混合均勻的培養(yǎng)基 15±1ml,混合均勻使其凝固,倒置,37℃培養(yǎng)16小時 ,24小時 和48小時,觀察結(jié)果 。
  7. 如果使用表面接種程序:將培養(yǎng)基傾注于已滅菌的培養(yǎng)皿中(用前貯存于2-8℃,避光,接種前應(yīng)先恢復(fù)至室溫)。樣品劃線接種或者涂布接種于 培養(yǎng)基表面,在37℃培養(yǎng)18小時,24小時和48小時,觀察結(jié)果。

貯存

1、法國科瑪嘉VRE顯色培養(yǎng)基干粉需保存在15-30℃干燥環(huán)境中,增補劑保存于2-8℃環(huán)境下。

2、傾注好的培養(yǎng)基在室溫可保存一天,2-8℃冰箱中避光可以貯存兩星期。

結(jié)果

微生物

菌落顏色

VRE糞腸球菌 、尿腸球菌

VRE雞腸球菌、鉛黃腸球菌

其他革蘭氏陽性細菌

革蘭氏陰性菌

玫瑰色至紫色

藍色或被抑制

被抑制

被抑制

★ 極少數(shù)其他菌屬菌株如乳酸桿菌素可能呈現(xiàn)很小的紫色菌落。

★ 使用過的培養(yǎng)基需要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按照有關(guān)規(guī)定丟棄。

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